膜蛋白重懸液(BN電泳用)
貨號
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名稱
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規(guī)格
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PN1020
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膜蛋白重懸液(BN電泳用)
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5 ml
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● 產(chǎn)品簡介
該產(chǎn)品配套動物膜蛋白提取試劑盒(貨號:RTD8111,RTD8112)和動物線粒體提取試劑盒(貨號:RTD8115,RTD8116)使用。含有終濃度10%甘油,用于膜蛋白的沉淀的重懸,重懸后的膜蛋白沉淀可以-20℃或-80℃貯存。
● 貯存、效期和運輸:
-20℃貯存;一年有效;濕冰運輸。
● 使用方法:
1 膜蛋白BN非變性樣品處理:
1.1 建議使用50
μl膜蛋白重懸液(BN電泳用)(貨號:PN1020)重懸膜蛋白沉淀;
1.2 BCA方法測定蛋白濃度(貨號:RTP7102);
1.3
用膜蛋白重懸液(BN電泳用)調(diào)整蛋白濃度為1
μg/μl,按需分裝,每管50
μl,-80℃保存待用;
1.4 取一管50
μl樣品,溶化混勻后4℃
16000 g 5分鐘,去除上清,保留沉淀;
1.5
沉淀中加入50
μl膜蛋白增溶液A(貨號:DM1080),輕柔重懸沉淀,盡量不產(chǎn)生氣泡,冰浴10分鐘;
1.6
4℃ 16000 g 15分鐘,取上清至一干凈1.5 ml離心管中即為增溶后膜蛋白溶液(小心不要吸取沉淀),此時得到的膜蛋白濃度為1
μg/μl,其中去垢劑DDM(n-Dodecyl
β-D-maltoside,β-DM n-十二烷基-β-D-麥芽糖苷)終濃度為1%;
1.7
膜蛋白溶液中加入1/10體積10×膜蛋白A型上樣緩沖液(配套膜蛋白增溶液A使用)(貨號:PL130),使用BN凝膠電泳(貨號:RTD6139,RTD6140),每個泳道上樣5-20
μg。