離心式去垢劑去除柱
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貨號
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名稱
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規(guī)格
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DD0550
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離心式去垢劑去除柱（處理25-100 μl蛋白樣品）
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10套
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● 產(chǎn)品組成：
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貨號
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名稱
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規(guī)格
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DD0550-01
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0.5 ml去垢劑去除柱（含套管）
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10套
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DD0550-02
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2 ml尖底離心管
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10個
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● 產(chǎn)品介紹：
離心式去垢劑去除柱能夠通過離心快速去除蛋白溶液或質譜分析中肽段溶液中的常用去垢劑，包括離子型去垢劑，非離子去垢劑和兩性離子去垢劑。在蛋白實驗中，去垢劑在促進蛋白溶解，增加蛋白穩(wěn)定性以及阻止蛋白聚集方面都有重要作用。然而，蛋白溶液中的去垢劑會對下游實驗產(chǎn)生影響，如ELISA，等電聚焦以及質譜分析等。在質譜分析中，去垢劑會與肽段形成加合離子抑制肽段離子化，導致m/z值的遷移。因此，質譜分析中去除肽段溶液中多余的去垢劑是影響分析結果的重要因素。該去除柱可以高效（＞95%）去除樣品中各種常用的去垢劑（濃度范圍1-5%）。
去垢劑去除柱參數(shù)如下：
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柱體積
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填料溶脹后體積
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處理樣品體積
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推薦起始樣品濃度
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去除效率
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0.5
ml
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~0.6
ml
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25-100
μl
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＞0.5 μg/μl
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~95%
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● 貯存、運輸和效期：
4℃貯存（不能冷凍）；常溫運輸；有效期1年。
● 操作步驟
一、 去垢劑去除柱預處理：
1.1 取出柱子，放入套管中。
1.2 旋開管蓋，不要擰掉柱子底部堵頭，加入0.4
ml 1×PBS，蓋緊管蓋，常溫靜置2
min，活化填料。
1.3 擰掉柱子底部堵頭，將柱子放入套管中，1000 g 離心1
min，棄流穿液。
注：離心力不要高于1000
g，過高的離心力會損傷填料，降低去垢劑去除效率。
1.4在柱子管蓋上標記填料在柱子內的傾斜方向，隨后離心步驟均按同一傾斜方向在離心機內放置柱子。
1.5柱子中加入0.4
ml 1×PBS，1000
g 離心1min，棄流穿液。至此，柱子活化結束，備用。
二、樣品去垢劑去除：
2.1 將柱子轉移到2
ml尖底離心管中，加入25-100
μl待處理樣品（樣品濃度高于0.5
μg/μl），常溫靜置2
min。
2.2 1000g 離心2
min，收集離心管內樣品。
● 注意事項：
1. 去垢劑去除效果：可以高效的（＞95%）去除樣品中各種常用的去垢劑（濃度范圍1-5%）。
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去垢劑去除效率和蛋白回收效率
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去垢劑
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濃度
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去除效率
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BSA回收效率
（上樣量100 μg）
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SDS
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2.5%
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99%
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95%
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脫氧膽酸鈉
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5%
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99%
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99%
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CHAPS
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3%
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99%
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90%
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Triton
X-100
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2%
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99%
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87%
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NP-40
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1%
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95%
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91%
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Brij-35
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1%
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99%
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97%
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Tween-20
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0.25%
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99%
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87%
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Octyl
glucoside
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5%
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99%
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90%
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2. 樣品處理體積要在柱子處理范圍內，該去除柱最多處理體積是100
μl樣品，過多會導致收集
管中液體浸沒到去除柱。
3.
當樣品濃度過低時（<0.5
μg/μl)，需先將樣品濃縮到所需體積或所需濃度。
● 常見問題：
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常見問題
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可能原因
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解決方法
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蛋白回收率偏低
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蛋白濃度過低（<0.5 μg/μl)
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對蛋白液進行適當濃縮
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樣品不能流穿
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未扭掉柱子底部的堵頭
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按照步驟1.3扭掉堵頭
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● 實驗示例：